Ифлосшавии фарҳангҳои ҳуҷайра метавонад ба осонӣ мушкилоти маъмултарин дар лабораторияҳои фарҳанги ҳуҷайра гардад, ки баъзан оқибатҳои хеле вазнинро ба бор меорад.Ифлоскунандаҳои фарҳанги ҳуҷайраро ба ду категория тақсим кардан мумкин аст, ифлоскунандаҳои кимиёвӣ ба монанди олудаҳои миёна, зардоб ва об, эндотоксинҳо, пластификаторҳо ва шустушӯй ва ифлоскунандаҳои биологӣ ба монанди бактерияҳо, қолабҳо, хамиртурушҳо, вирусҳо, микоплазма сирояти убур мекунанд.Бо дигар хатҳои ҳуҷайра олуда шудааст.Ҳарчанд пурра бартараф кардани ифлосшавӣ ғайриимкон аст, басомад ва шиддатнокии онро тавассути фаҳмидани ҳамаҷонибаи манбаи он ва риояи усулҳои хуби асептикӣ коҳиш додан мумкин аст.
1. Дар ин бахш намудҳои асосии ифлосшавии биологӣ нишон дода шудаанд:
Ифлосшавии бактериявӣ
Олудашавӣ бо қолаб ва вирус
Ифлосшавии микоплазма
Ифлосшавии хамиртуруш
1.1 Ифлосшавии бактериявӣ
Бактерияҳо як гурӯҳи калони микроорганизмҳои якҳуҷайравӣ мебошанд.Одатан диаметри онҳо ҳамагӣ чанд микрон буда, метавонанд дар шаклҳои гуногун, аз сфера то асо ва спиралҳо бошанд.Аз сабаби ҳама ҷо, ҳаҷм ва суръати афзоиши босуръати онҳо, бактерияҳо дар якҷоягӣ бо хамиртурушҳо ва қолабҳо ифлоскунандаи маъмултарини биологӣ дар фарҳанги ҳуҷайра мебошанд.
1.1.1 Муайян кардани ифлосшавии бактерияҳо
Ифлосшавии бактериявӣ тавассути азназаргузаронии визуалии фарҳанг дар давоми чанд рӯзи пас аз сироят шуданаш ба осонӣ муайян карда мешавад;
Фарҳангҳои сироятшуда одатан абрнок мешаванд (яъне тира), баъзан бо филми тунук дар рӯи он.
Қатраҳои ногаҳонӣ дар pH муҳити фарҳангӣ низ зуд-зуд дучор меоянд.
Дар зери микроскопи камқувват, бактерияҳо ҳамчун гранулҳои хурди ҳаракаткунанда байни ҳуҷайраҳо пайдо мешаванд ва мушоҳида дар зери микроскопи пурқувват метавонад шаклҳои бактерияҳои алоҳидаро ҳал кунад.
1.2 Олудашавӣ бо қолаб ва вирус
1.2.1 Ифлосшавии қолаб
Молҳо микроорганизмҳои эукариотии салтанати занбӯруғҳо мебошанд, ки дар шакли филаментҳои бисёрҳуҷайравӣ бо номи гифа мерӯянд.Шабакаҳои пайвасткунандаи ин филаментҳои бисёрҳуҷайра дорои ядроҳои аз ҷиҳати генетикӣ якхела мебошанд, ки колонияҳо ё мицелий ном доранд.
Монанди ифлосшавии хамиртуруш, рН-и фарҳанг дар марҳилаи аввали ифлосшавӣ мӯътадил боқӣ мемонад ва пас аз он ки фарҳанг шадидтар сироят меёбад ва абрнок мешавад, зуд меафзояд.Дар зери микроскоп мицелий одатан филаментшакл буда, баъзан дар шакли кластерхои зиччи спорахо иборат аст.Спораҳои бисёр қолабҳо метавонанд дар муҳитҳои бениҳоят сахт ва номусоид дар марҳилаи нофаъолии худ зинда монад ва танҳо вақте фаъол мешаванд, ки шароити дурусти афзоиш пайдо шавад.
1.2.2 Олудашавии вирус
Вирусҳо агентҳои сироятии микроскопӣ мебошанд, ки дастгоҳи ҳуҷайраи мизбонро барои дубора тавлид мекунанд.Андозаи хеле хурди онҳо онҳоро дар фарҳанг ошкор кардан ва аз реактивҳое, ки дар лабораторияҳои фарҳанги ҳуҷайра истифода мешаванд, душвор мегардонад.Азбаски аксари вирусҳо нисбат ба мизбонашон талаботи хеле сахт доранд, онҳо одатан ба фарҳангҳои ҳуҷайраҳои намудҳои ғайр аз мизбон таъсири манфӣ намерасонанд.
Бо вуҷуди ин, истифодаи фарҳангҳои ҳуҷайраҳои бо вирус сироятшуда метавонад ба саломатии кормандони лаборатория хатари ҷиддӣ эҷод кунад, хусусан агар ҳуҷайраҳои инсон ё приматҳо дар лаборатория парвариш карда шаванд.
Сирояти вирусиро дар фарҳангҳои ҳуҷайра тавассути микроскопияи электронӣ, ранг кардани иммунӣ бо маҷмӯи антитело, ELISA ё PCR бо праймерҳои мувофиқи вирусӣ муайян кардан мумкин аст.
1.3 Ифлосшавии микоплазма
Микоплазма бактерияҳои оддии бе деворҳои ҳуҷайра мебошанд ва гумон мекунанд, ки онҳо хурдтарин организмҳои худпликашаванда мебошанд.Аз сабаби андозаи ниҳоят хурди онҳо (одатан камтар аз 1 микрон), микоплазмаро то он даме, ки онҳо ба зичии ниҳоят баланд расад ва боиси бад шудани маданияти ҳуҷайраҳо гардад, муайян кардан душвор аст;То он вақт, одатан аломати ошкори сироят вуҷуд надорад.
1.3.1 Муайян кардани ифлосшавии микоплазма
Баъзе микоплазмаҳои суст афзоянда метавонанд дар фарҳангҳо бе марги ҳуҷайра боқӣ монанд, аммо онҳо рафтор ва мубодилаи ҳуҷайраҳои мизбонро дар фарҳангҳо тағир медиҳанд.
Сирояти музмини микоплазма метавонад бо коҳиши суръати паҳншавии ҳуҷайраҳо, кам шудани зичии сершавӣ ва агглютинатсия дар фарҳанги суспензия тавсиф карда шавад.
Бо вуҷуди ин, ягона роҳи боэътимоди ошкор кардани ифлосшавии микоплазма ин санҷиши мунтазами фарҳанг бо истифодаи рангкунии флуоресцентӣ (масалан, Hoechst 33258), ELISA, PCR, иммуностимологӣ, авторадиография ё санҷиши микробҳо мебошад.
1.4 Ифлосшавии хамиртуруш
Хамиртурушҳо эукариотҳои якҳуҷайраи салтанати занбӯруғҳо мебошанд, ки андозаашон аз чанд микрон (одатан) то 40 микрон (аҳён) мебошанд.
1.4.1 Муайян кардани ифлосшавии хамиртуруш
Мисли ифлосшавии бактериявӣ, фарҳангҳои бо хамиртуруш олудашуда метавонанд абрнок шаванд, хусусан агар ифлосшавӣ дар марҳилаи пешрафта бошад.РН-и фарҳангҳои бо хамиртуруш олудашуда хеле кам тағир меёбад, то он даме, ки ифлосшавӣ шадидтар шавад, дар ин марҳила рН одатан зиёд мешавад.Дар зери микроскоп хамиртуруш ҳамчун зарраҳои инфиродии тухмшакл ё сферикӣ пайдо мешаванд ва метавонанд зарраҳои хурдтар ба вуҷуд оранд.
2.Инфексияи салиб
Гарчанде ки ифлосшавии микробҳо он қадар маъмул нест, ифлосшавии васеи хати ҳуҷайраҳо бо HeLa ва дигар хатҳои ҳуҷайраи зуд афзоянда мушкилоти дақиқ муайяншуда бо оқибатҳои ҷиддӣ мебошад.Хатҳои ҳуҷайраро аз бонкҳои бонуфузи ҳуҷайра дастрас кунед, хусусиятҳои хатҳои ҳуҷайраро мунтазам тафтиш кунед ва усулҳои хуби асептикиро истифода баред.Ин амалҳо ба шумо кӯмак мекунанд, ки аз ифлосшавии байнисоҳавӣ канорагирӣ кунед.Изҳои ангуштони ДНК, кариотипсозӣ ва изотипизатсия метавонанд тасдиқ кунанд, ки оё дар фарҳанги ҳуҷайраи шумо ифлосшавии салиб вуҷуд дорад.
Гарчанде ки ифлосшавии микробҳо он қадар маъмул нест, ифлосшавии васеи хати ҳуҷайраҳо бо HeLa ва дигар хатҳои ҳуҷайраи зуд афзоянда мушкилоти дақиқ муайяншуда бо оқибатҳои ҷиддӣ мебошад.Хатҳои ҳуҷайраро аз бонкҳои бонуфузи ҳуҷайра дастрас кунед, хусусиятҳои хатҳои ҳуҷайраро мунтазам тафтиш кунед ва усулҳои хуби асептикиро истифода баред.Ин амалҳо ба шумо кӯмак мекунанд, ки аз ифлосшавии байнисоҳавӣ канорагирӣ кунед.Изҳои ангуштони ДНК, кариотипсозӣ ва изотипизатсия метавонанд тасдиқ кунанд, ки оё дар фарҳанги ҳуҷайраи шумо ифлосшавии салиб вуҷуд дорад.
Вақти интишор: феврал-01-2023